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關(guān)于克倫特羅檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理及注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2023-08-04      點(diǎn)擊次數(shù):1185
克倫特羅檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
本試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗克倫特羅抗原。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競(jìng)爭(zhēng)性地與克倫特羅抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測(cè),樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí),都須注意:
實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
注意事項(xiàng)
室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上,請(qǐng)盡快用水沖洗。
不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
保存試劑盒于2-8℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450nm)值小于0.5(A450nm<0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
在加入底物液后,一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20分鐘(或更長(zhǎng)),但不得超過30分鐘。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。
該試劑盒佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。 
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